基于VLP进行跨膜蛋白真核表达和纯化

微泰克技术团队在基于病毒的包膜蛋白和自主包装的特性开发了基于VLP颗粒进行跨膜蛋白真核的技术，从而实现真核跨膜蛋白的体外获得途径。将编码目标Gag蛋白（例如GFP或Cre）的表达载体与表达VSV-G包膜蛋白的载体共转染，可产生具有感染性但复制缺陷的VLP，其滴度约为7×106个VLP/mL。经电子显微镜测定，VLP的尺寸估计在80至130纳米之间。

先前的研究表明，将所需的蛋白质货物融合到逆转录病毒gag多聚蛋白的C末端，足以将该货物蛋白直接包装到逆转录病毒颗粒中。通过转染293T生产细胞，将表达FMLV gag-ABE8e融合构建体、野生型FMLV gag-pro-pol多聚蛋白、水泡性口炎病毒G (VSVG)包膜糖蛋白质粒转染到293T生产细胞中，从而制备了BE-VLP。从生产细胞上清液中收获BE-VLP后，浓缩后获得跨膜蛋白颗粒。