2025年8月，洛克菲勒大学的Jeffrey V. Ravetch团队用一项里程碑式研究改写了这一困局——其研发的Fc工程优化CD40激动剂抗体2141.V11，通过瘤内注射的方式，在12例转移性癌症患者中展现出“安全且惊艳”的初步疗效：6例患者肿瘤缩小，其中2例（黑色素瘤和乳腺癌各1例）实现完全缓解（体内癌细胞彻底消失），更罕见的是，未直接注射的转移灶也因免疫系统激活被清除，相关成果近日发表于《癌细胞》（Cancer Cell）杂志。 

CD40蛋白（TNF receptor superfamily member 1b，CD40）属于TNF因子受体超家族成员，主要表达在B细胞、抗原提呈细胞（APC）、树状突细胞（DC）、巨噬细胞和单核细胞表面，另外，还广泛表达于内皮细胞、血小板和肿瘤细胞表面。其配体为CD40L蛋白（CD152），主要表达在活化的CD4+T细胞，活化的B细胞和血小板表面；单核细胞，NK细胞，肥大细胞，和碱性粒细胞在炎症刺激条件下可诱导表达。CD40L的分泌可溶形式主要激活CD40通路。CD40与CD40L结合活化信号转导通路，主要介导细胞免疫反应和炎症反应，包括T细胞依赖的免疫球蛋白类型转换，记忆性B细胞成熟和发育。从此介导B细胞和树状突细胞加强对T细胞的抗肿瘤效果，并促使巨噬细胞重塑杀伤肿瘤细胞。

合活性

用酶联免疫吸附方法（ELISA）方法和流式细胞技术（FCM）检测鼠源抗体#MTP1006对CD40-His（#MTP1007）（图1）和293T-hCD40（#MTP1003）（图2）稳定表达细胞的结合活性。

拮抗活性

用流式细胞技术（FCM）检测#23D6抗体与CD40L（#MT008）融合蛋白竞争结合CD40-His（#MT007）蛋白。

信号转导通路活性与转录活性

293T-hCD40（#MTC003）细胞表面重组表达全长hCD40蛋白，并整合NF-κB结合序列作为启动子的萤光素酶基因于细胞基因组中。通过萤光素酶报告基因的方法（Luciferase reporter assay），检测抗CD40抗体活化CD40信号转导通路能力，抗体活化能力的强弱与萤光素酶的转录水平正相关（图4）。